KLONING DAN EKSPRESI GEN MELANOMA ANTIGEN-A1

Buku ini secara keseluruhan akan membahas tentang cara mendapatkan protein rekombinan MAGE-A1 dari jaringan liver penderita hepatocellular carcinoma  dan testis. Bagian awal buku ini menjelaskan tentang kajian teori tentang gen MAGE-A1 dan hepatocellular carcinoma,  Konsep dasar tentang kloning dan karakterisasi protein. Bagian isi menjelaskan tentang 1) konsep dan alur kerja kloning  gen MAGE-A1, 2) persiapan spesimen dan primer, 3) Identifikasi gen MAGE-A1 yang meliputi Isolasi mRNA, Sintesis cDNA dengan RT PCR, dan Amplifikasi dengan PCR; 4) Isolasi sekuen area koding atau disebut CoDing Sequence (CDS) gen MAGE-A1 yang meliputi amplifikasi dengan semi-nested PCR dan purifikasi; 5) Kloning gen MAGE-A1 yang meliputi insersi gen MAGE-A1 ke pET101/D- TOPO, transformasi ke E. coli Top10, dan isolasi plasmid; 6) Analisis plasmid  rekombinan pETGM/MAGE1-Testis dan pETGM/MAGE1-HCC yang meliputi sekuensing dan restriksi dengan EcoRV; 7) Ekspresi dan purifikasi protein rekombinan MAGE-A1 yang meliputi transformasi ke E. coli BL21 star dan purifikasi protein rekombinan MAGE-A1, 8) Analisis protein rekombinan MAGE-A1 yang meliputi SDS-PAGE dan Western blotting; dan bagian penutup.